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摘要:目的:研究转化生长因子β3(Transforming growth factor-β3,TGF-β3)在四氯二苯二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzodioxin, TCDD)致胎鼠先天性腭裂中的意义。办法: C57BL/6J小鼠按雌雄各一的比例合笼过夜交配,第二日晨检查雌鼠外阴,见阴栓者记为妊娠第0天(gestational day,GD)。GD10,实验组从TCDD64μg/kg灌胃,对照组从等量玉米油灌胃。于GD18.5解剖显微镜下观察胎鼠腭裂的发生率,并于GD13.5、GD14.5和GD15.5剪取胎鼠腭突组织提取DNA、RNA及蛋白,采取逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR)和Western blot检测TGF-β3基因的表达状况、RT-PCR检测Smad2~4及Smad7表达状况、甲基化特异性PCR(Methylmion Specific PCR,MSP)检测TGF-β3基因启动子甲基化水平。结果: TCDD可成功诱导建立C57BL/6J小鼠先天性腭裂模型,实验组腭裂发生率为100%,对照组无腭裂发生,实验组和对照组腭裂发生率具有统计学差别(P0.05)。在GD13.5、GD14.5和GD15.5,RT-PCR及Western-blot均显示实验组TGF-β3基因表达明显高于对照组(P0.05)。RT-PCR显示实验组和对照组Smad2~4及Smad7表达无明显差别。MSP提示实验组和对照组TGF-β3基因启动子均处于非甲基化状态。结论:本探讨证实,TCDD可致C57BL/6J胎鼠发生先天性腭裂,并明显上调TGF-β3基因在整个腭突融合历程中的表达。TGF-β3的过高表达可能是TCDD诱发先天性腭裂的主干信号通路之一,但可能并非通过经典的TGF-β/Smad信号通路和TGF-β3基因甲基化修饰而发生意义。 关键词:腭裂论文 四氯二苯二噁英论文 转化生长因子β3论文
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    英汉缩略语名词对照6-8

    中文摘要8-10

    ABSTRACT10-12

    前言12-17

    参考文献14-17

    第一部分 TCDD 诱导建立小鼠先天性腭裂模型的实验探讨17-24

    1 材料与办法17-19

    2 实验结果19-20

    3 讨论20-21

    4 小结21-23

    参考文献23-24

    第二部分 TCDD 对胎鼠腭突组织中 TGF-Β3、SMAD2、SMAD3、SMAD4 及 SMAD7 表达的影响24-43

    1 材料与办法24-33

    2 结果33-38

    3 讨论38-40

    4 小结40-41

    参考文献41-43

    第三部分 TCDD 对胎鼠腭突组织中 TGF-Β3 基因启动子甲基化水平的影响43-52

    1 材料与办法43-47

    2 结果47-48

    3 讨论48-49

    4 结论49-50

    参考文献50-52

    全文总结52-53

    文献综述53-60

    参考文献56-60

    致谢60-61

    硕士期间撰写的文章61-62

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